第一個(gè)PD-1抗體：Opdivo的開發(fā)故事

2018年9月5日 | Filed under: 抗腫瘤藥,熱門話題,文獻(xiàn)綜合 | Posted by: 張繼

2018-9-5-1

隨著PD-1抗體藥物歐狄沃(英文商品名: Opdivo, 英文通用名:Nivolumab)已于8月28號在中國進(jìn)入鋪貨銷售階段，國內(nèi)肺癌患者終于可以使用到這一革命性的抗癌藥物。作者由于工作原因，過去一年多里閱讀了一些這個(gè)藥物的開發(fā)歷程的文獻(xiàn)。發(fā)現(xiàn)之前中文報(bào)道中，多少有些和作者了解到的事實(shí)有所出入，特撰此文，供大家討論。

第一部分：PD-1的發(fā)現(xiàn)和PD-1功能的鑒定

1992年，日本科學(xué)家TasukuHonjo?(本庶佑) 從小鼠上分離、鑒定了PD-1基因，得到了小鼠PD-1蛋白，這一成果發(fā)表在1992年的EMBO雜志上(1)。在這篇文章中，本庶佑認(rèn)為屬于免疫球蛋白超家族的PD-1的活化會導(dǎo)致T細(xì)胞的凋亡，這也是PD-1蛋白的命名由來（Programmed Death-1）。本庶佑在這篇文章中公布了PD-1蛋白的序列，隨后幾年接連發(fā)表了一系列研究PD-1的成果，如1994年他找到了人類PD-1基因和蛋白（2），并在1999年首先提出PD-1是一個(gè)免疫系統(tǒng)的負(fù)調(diào)控因子（3）。這一成果在當(dāng)時(shí)并未引起學(xué)界太多重視，就連本庶佑本人也是以B細(xì)胞的發(fā)育和功能作為自己的主要研究方向。

2000年，在丹娜法伯癌癥研究院（Dana-Farber Cancer Institute, DFCI，隸屬于哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院）工作的Gordon Freeman和本庶佑作為第一作者和通訊作者，共同闡述了PD-1/PD-L1對人體T細(xì)胞的調(diào)控作用，這一領(lǐng)域才逐漸引起重視（4）。在這篇文章中，F(xiàn)reeman等人不僅發(fā)現(xiàn)了屬于B7蛋白家族的PD-L1蛋白是PD-1的配體，還首先證明了 PD-L1通過結(jié)合PD-1，抑制了T細(xì)胞的增殖和分泌細(xì)胞因子功能。Freeman關(guān)注到PD-1并非偶然，他和妻子Arlene Sharpe一直從事B7蛋白家族的研究。他們先前就通過生物信息學(xué)的辦法找到了很多和B7蛋白基因相似的B7蛋白家族成員。根據(jù)CTLA-4蛋白會和B7家族的B7-1、B7-2蛋白結(jié)合, PD-1蛋白又和CTLA-4結(jié)構(gòu)有類似片段，同屬一個(gè)蛋白家族等已知信息，F(xiàn)reeman推測自己發(fā)現(xiàn)的B7蛋白家族中，可能有PD-1的配體。當(dāng)時(shí)PD-1尚未成為熱門研究領(lǐng)域，沒有商業(yè)化的PD-1蛋白供實(shí)驗(yàn)用，F(xiàn)reeman于是和本庶佑合作，就此發(fā)現(xiàn)了PD-L1和PD-1在免疫系統(tǒng)里的負(fù)調(diào)控功能。Gordon Freeman 79年哈佛博士畢業(yè)后就加入了DFCI，從博士后做起。本庶佑1984年開始就在東京大學(xué)任職，先前中文報(bào)道里有不少說Gordon Freeman是本庶佑的博士后，這個(gè)說法應(yīng)不是事實(shí)。

華裔學(xué)者陳列平教授當(dāng)時(shí)也從事B7家族蛋白的研究，通過和Freeman類似的生物信息學(xué)方法，他于1999年12月首先發(fā)表了PD-L1的基因及蛋白序列(5)，在這篇文章中，陳列平以B7H1稱呼PD-L1蛋白。遺憾的是陳列平?jīng)]有找到B7H1的配體，而且標(biāo)題中認(rèn)為B7H1是共刺激T細(xì)胞的增殖，這和后來多數(shù)人的認(rèn)知略有不同。陳列平的文章比Freeman早10個(gè)月公布。Freeman的相關(guān)專利于1999年8月提交，比陳列平早3個(gè)月，在這個(gè)專利中Freeman也公布了PD-L1的序列，可以認(rèn)為陳列平和Freeman幾乎同時(shí)發(fā)現(xiàn)了PD-L1蛋白。后來陳列平于2002年發(fā)表文章，指出大多數(shù)腫瘤細(xì)胞通過表達(dá)PD-L1實(shí)現(xiàn)免疫逃逸（6），這為開發(fā)PD-1/PD-L1藥物用于癌癥治療提供了重要理論依據(jù)。

在發(fā)現(xiàn)PD-1/PD-L1通路對T細(xì)胞有負(fù)調(diào)控作用后，當(dāng)時(shí)科學(xué)家們普遍認(rèn)為這條通路可能用于自身免疫疾病藥物的開發(fā)，2001年6月左右，本庶佑與小野制藥(ono pharmaceutical)一起提交了一項(xiàng)國際專利：substance specific to human PD-1(7)。在這個(gè)專利保護(hù)下，任何物質(zhì)，只要特異性與人PD-1蛋白結(jié)合，就侵犯了本庶佑和小野制藥的專利。這個(gè)專利在今天可能不會被批準(zhǔn)：專利的內(nèi)容主要是PD-1的基因和蛋白序列，沒有列出證據(jù)證明阻斷PD-1可以用作免疫療法。這個(gè)專利的影響，隨后還會提到。

第二部分：Medarex的研發(fā)過程

2001年初，王常玉從Chiron公司作為研發(fā)科學(xué)家加入Medarex公司，在Chiron期間，王常玉研發(fā)了CD-40抗體，這個(gè)產(chǎn)品今天還在諾華公司的開發(fā)管線里。此時(shí)Medarex的CTLA-4抗體開發(fā)已進(jìn)入后期，公司開始考慮后續(xù)項(xiàng)目。基于下述幾點(diǎn)原因，Medarex的開發(fā)團(tuán)隊(duì)選中了PD-1/PD-L1作為新靶點(diǎn)開發(fā)腫瘤免疫藥物：

PD-1和CTLA-4同屬一個(gè)蛋白家族，開發(fā)同類產(chǎn)品對Medarex這樣的小型公司來說或許能降低系統(tǒng)性風(fēng)險(xiǎn)。
本庶佑于1999年的文章（3）指出PD-1 敲除后的小鼠會出現(xiàn)一些自身免疫性疾病癥狀，在有些鼠系里表現(xiàn)為紅斑狼瘡，有些則表現(xiàn)為心肌炎（心肌炎這一副作用日后在接受PD-1抗體治療的病人身上也出現(xiàn)過）。但發(fā)病較晚，沒有像CTLA-4敲除小鼠出生后一月內(nèi)很快死亡。證明PD-1/PD-L1通路與體內(nèi)免疫調(diào)節(jié)有關(guān)系，但副作用可能較低。
PD-1/PD-L1通路是一個(gè)負(fù)調(diào)控因子，當(dāng)時(shí)多數(shù)的免疫療法類新藥項(xiàng)目是激活免疫細(xì)胞上的靶點(diǎn)蛋白為目的，比如IL-2、CD40抗體、4-1BB抗體等。Medarex的研發(fā)團(tuán)隊(duì)認(rèn)為，刺激免疫細(xì)胞的藥物就像轟油門，臨床開發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)很高：難以控制毒性。而負(fù)調(diào)控因子就像踩剎車，這類因子往往只存在于已激活的T細(xì)胞里，比如正常的T細(xì)胞不表達(dá)PD-1，毒性相對較小。這一觀點(diǎn)在后續(xù)的臨床上也得到了驗(yàn)證：4-1BB抗體和CD40抗體的毒性都太強(qiáng)，很難控制。

十多年后回過頭看，當(dāng)時(shí)Medarex在這個(gè)項(xiàng)目上承擔(dān)了巨大的風(fēng)險(xiǎn)：PD-1不是研究的熱點(diǎn)，除了本庶佑團(tuán)隊(duì)的成果外沒有什么文獻(xiàn)和數(shù)據(jù)提供理論支持。Medarex在立項(xiàng)和開發(fā)時(shí)也沒有得到任何外部人員的協(xié)助和指導(dǎo)，他們立項(xiàng)時(shí)甚至不知道本庶佑已經(jīng)申請了關(guān)于PD-1的專利。Medarex對PD-1的認(rèn)識也有一定局限性，并沒有預(yù)測到PD-1抗體會成為新一代廣譜性、革命性的抗癌藥物。這也埋下了日后出售自己的種子。

除此以外，當(dāng)時(shí)該項(xiàng)目的研究條件不充分，所有的實(shí)驗(yàn)材料都要靠Medarex團(tuán)隊(duì)自己解決。王常玉帶領(lǐng)的團(tuán)隊(duì)啟動這個(gè)項(xiàng)目時(shí)，PD-1，PD-L1, PD-L2這三個(gè)靶點(diǎn)蛋白都要自己動手PCR克隆基因并表達(dá)蛋白，而無法外購。當(dāng)時(shí)很多實(shí)驗(yàn)條件也不成熟，需要在實(shí)踐中摸索，最先攻克的是PD-L1的基因克隆和蛋白表達(dá)，所以在Medarex的內(nèi)部代號里，PD-L1項(xiàng)目的代號是MDX-1105，反而排在PD-1項(xiàng)目MDX-1106前面，MDX-1107則是PD-L2項(xiàng)目的代號。

借助Medarex當(dāng)時(shí)已有的人源化小鼠抗體平臺，Medarex的研究人員用PD-1、PD-L1和PD-L2蛋白注射小鼠，并從小鼠脾臟里分離到了能生產(chǎn)上述抗體的B細(xì)胞，再通過融合B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，就得到了能長期穩(wěn)定產(chǎn)生上述抗體的雜交瘤細(xì)胞株。這項(xiàng)工作由是雜交瘤組的吳儀和黃海春協(xié)助完成。

通過測序知道篩選到的PD-1抗體的可變區(qū)后，Medarex團(tuán)隊(duì)設(shè)計(jì)了新的序列，將PD-1抗體的可變區(qū)與IgG4恒定區(qū)結(jié)合，同時(shí)將IgG4恒定區(qū)的228位點(diǎn)絲氨酸替換成脯氨酸，解決了天然IgG4抗體在體內(nèi)的不穩(wěn)定性問題。這樣就得到了Nivolumab。

MDX-1106在抗體篩選階段是比較順利的，2001年初立項(xiàng)，同年底就拿到了先導(dǎo)抗體。隨后的臨床前開發(fā)工作花費(fèi)了大量的時(shí)間，比如建立體外活性檢測方法、小鼠動物模型及食蟹猴毒理實(shí)驗(yàn)方法等等。PD-1在當(dāng)時(shí)仍屬全新領(lǐng)域，基礎(chǔ)科研缺乏積累，團(tuán)隊(duì)必須在一片空白中進(jìn)行開拓性的研究，在實(shí)踐中探索全新的實(shí)驗(yàn)方法。其中主要難點(diǎn)在于找到一個(gè)可靠的魯棒性體外實(shí)驗(yàn)方法以評估抗體的功能和活性，經(jīng)過一年多的努力，終于完成了方法的建立。隨后的動物模型實(shí)驗(yàn)也多有波折，當(dāng)時(shí)主流的小鼠腫瘤模型對PD-1抗體基本沒有應(yīng)答，直到2004年底才在MC38腫瘤模型上觀察到了一定療效。如今全球各地的PD-1/PD-L1抗體開發(fā)項(xiàng)目多會使用MC38腫瘤模型。

出于公司知識產(chǎn)權(quán)等方面的考慮，Medarex在完成Nivolumab的研發(fā)后，只通過專利的形式對Nivolumab進(jìn)行了保護(hù)，未立刻發(fā)表文章。直到2014年Nivolumab上市前夕才發(fā)表文章，詳細(xì)介紹了Nivolumab的篩選和鑒定過程及食蟹猴毒理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)（8），此文第一作者是王常玉。按照文中提及的團(tuán)隊(duì)分工，王常玉負(fù)責(zé)這個(gè)項(xiàng)目的概念設(shè)計(jì)、試驗(yàn)方法的開發(fā)等等工作以及項(xiàng)目的監(jiān)督，是Nivolumab毫無爭議的第一發(fā)明人。

2003年1月，本庶佑和小野制藥的專利（7）公布了，Medarex意識到自己的PD-1抗體可能繞不開這個(gè)專利，作為早期研發(fā)型公司也需要合作伙伴分?jǐn)偢甙旱呐R床開發(fā)費(fèi)用，雙方于2005年5月13日宣布達(dá)成合作協(xié)議（9），新聞稿中明確提到使用小野制藥的PD-1專利和Medarex的抗體開發(fā)平臺以共同開發(fā)PD-1抗體。根據(jù)雙方的協(xié)議，小野制藥獲得了PD-1抗體除北美以外的全球權(quán)益，而Medarex保留了PD-1抗體在北美的商業(yè)權(quán)益。有理由相信，本庶佑和小野制藥并未重視PD-1單抗的臨床價(jià)值。2011年，收購了Medarex的百時(shí)美施貴寶公司（BMS），沒花什么代價(jià)就從小野制藥換回了PD-1抗體在歐洲和中國的商業(yè)權(quán)益(10)。Nivolumab在中國開始銷售的頭兩天的銷售額金額已超過1.5億元人民幣，這恐怕遠(yuǎn)出乎簽署協(xié)議雙方的意料。

2004年前后，Medarex一方面和小野制藥展開談判，一方面也在構(gòu)建自己的專利保護(hù)壁壘，趕在雙方達(dá)成協(xié)議前的2005年5月9日，提交了多份和PD-1相關(guān)的專利：Methods for treating cancer using anti-pd-1 antibodies（11）、Human Monoclonal Antibodies To Programmed Death 1(PD-1) And Methods For Treating Cancer Using Anti-PD-1 Antibodies Alone or in Combination with Other Immunotherapeutics（12）、Methods for treating cancer using anti-PD-1 antibodies in combination with anti-CTLA-4 antibodies（13）等等。先前有不少中文報(bào)道中認(rèn)為小野制藥參與了PD-1抗體的開發(fā)，一個(gè)理由就是上述專利中有小野制藥的名字。事實(shí)上，上述幾份專利的申請機(jī)構(gòu)和發(fā)明人均來自Medarex，與小野制藥完全無關(guān)。權(quán)利人中包含小野制藥的原因是2014年6月，BMS和小野制藥為了準(zhǔn)備起訴默沙東，雙方交叉持有相互授權(quán)對方一系列專利，從而在這些專利上添加了小野制藥。如果這些中文報(bào)道能看看專利的變遷過程，可能會有不同的結(jié)論。

2014年9月4日，在默沙東公司的PD-1單抗Keytruda獲得美國FDA批準(zhǔn)的當(dāng)夜，BMS向默沙東公司提起了訴訟,稱默沙東的Keytruda侵犯了BMS/小野制藥關(guān)于PD-1抗體用于治療癌癥的系列專利。

2017年1月20日，BMS/小野制藥公司宣布和默沙東就PD-1單抗的專利訴訟簽署了一項(xiàng)和解及全球?qū)＠S可協(xié)議（14）：默沙東要向BMS/小野制藥支付6.25億美元的首付款，以及在2017～2023年間Keytruda銷售額的6.5%，2024～2026年間Keytruda銷售額的2.4%，BMS和小野將按75/25的比例分成。粗略估算默沙東總共將支付超過60億美元。

第三部分：進(jìn)入臨床

2006年8月，Medarex的PD-1抗體MDX1106獲得美國FDA批準(zhǔn)進(jìn)入臨床I期試驗(yàn)，首批計(jì)劃入組39名癌癥復(fù)發(fā)的病人(15)。需要指出的是，Medarex的PD-L1抗體MDX1105也是全球首個(gè)進(jìn)入臨床階段的PD-L1抗體，于2008年8月獲得美國FDA批準(zhǔn)進(jìn)入臨床I期，首批計(jì)劃入組286名癌癥復(fù)發(fā)的病人（16）。MDX1105的臨床試驗(yàn)結(jié)果后來發(fā)表在新英格蘭雜志上（23），遺憾的是BMS主動放棄了MDX1105的后續(xù)開發(fā)。

作為一個(gè)全新的腫瘤免疫藥物，MDX1106早期的臨床試驗(yàn)幾經(jīng)周折，由于對腫瘤免疫藥物的不了解，最初的臨床試驗(yàn)終點(diǎn)選擇了傳統(tǒng)靶向藥物的臨床試驗(yàn)終點(diǎn)：無進(jìn)展生存期（PFS）和客觀應(yīng)答率（ORR）。腫瘤免疫藥物在這兩點(diǎn)上并不比傳統(tǒng)靶向藥物具有太多的優(yōu)勢。免疫藥物的真正優(yōu)勢：藥效持續(xù)時(shí)間長，應(yīng)答的癌癥病人存活期長，且有很大幾率實(shí)現(xiàn)臨床治愈等優(yōu)勢，要到臨床試驗(yàn)進(jìn)行好幾年以后才能被觀察到。Medarex管理層也對公司的未來有了疑慮，2009年，BMS以28億美元收購了Medarex，Medarex最終沒能獨(dú)立運(yùn)營到PD-1藥物大放光彩，成為新一代廣譜性革命性抗癌藥物的那一天，這是讓人扼腕嘆息的。

上述臨床試驗(yàn)的結(jié)果于2010年第一次公布（17），參與臨床試驗(yàn)的病人中，一位結(jié)直腸癌患者實(shí)現(xiàn)了完全緩解，一位黑色素瘤患者和一位腎癌患者實(shí)現(xiàn)了部分緩解。另有兩位黑色素瘤患者的腫瘤也得到了顯著縮小。隨后2012年在新英格蘭雜志上的后續(xù)結(jié)果更是驚艷：18%的非小細(xì)胞肺癌患者、28%的黑色素瘤患者和27%的腎癌患者得到了緩解，起效的病人中有66%的療效持續(xù)超過一年（18）。結(jié)合之后Medarex在各種醫(yī)學(xué)年會的報(bào)告，這一臨床結(jié)果引起了行業(yè)的重視，引來了同業(yè)的覬覦。

默沙東公司翻箱倒柜發(fā)現(xiàn)自己也有一個(gè)扔在后院垃圾堆里的PD-1抗體，來自于2009年5月并入默沙東的先靈葆雅公司。而先靈葆雅則從2007年收購荷蘭?Organon時(shí)獲得（19）。據(jù)福布斯日后的采訪，Organon的PD-1抗體在2003年才開始構(gòu)思，遠(yuǎn)落后于Medarex的MDX1106, 一開始的定位也是自身免疫性疾病（如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎）的輔助用藥，而非癌癥用藥。隨著兩次收購帶來的組織結(jié)構(gòu)重組和研發(fā)重心變遷、癌癥免疫藥物的進(jìn)展挫折不斷，Organon的團(tuán)隊(duì)已被告知PD-1抗體的研發(fā)工作應(yīng)予終止。但是2010年的BMS臨床試驗(yàn)改變了一切，默沙東公司在意識到PD-1抗體在癌癥治療上的巨大空間后重啟了自己的PD-1抗體項(xiàng)目（代號MK-3475)，并于2010年12月獲得批準(zhǔn)進(jìn)入臨床試驗(yàn)。

BMS后來宣稱：為了追趕進(jìn)度，默沙東不惜從BMS的前雇員Stephanie Schulman那里獲得機(jī)密信息（20），BMS為此對上述雙方都提起訴訟。在得知BMS不會在黑色素瘤適應(yīng)癥上快速推進(jìn)PD-1抗體，以避免和自家已有的CTLA-4抗體Yervoy在黑色素瘤適應(yīng)癥上的競爭后。默沙東公司采用了一個(gè)激進(jìn)的臨床方案設(shè)計(jì)：代號Keynote001的臨床I期試驗(yàn)不斷擴(kuò)大入組人數(shù)，從最初不到10人變成1260人。并用臨床I期試驗(yàn)的結(jié)果在美國申請了上市批準(zhǔn)，MK-3475于2014年9月4日獲得批準(zhǔn)，反而在黑色素瘤適應(yīng)癥上進(jìn)度上超過了BMS，以Keytruda為商品名成為第一個(gè)在美國上市銷售的PD-1抗體。

而BMS的PD-1抗體Nivolumab，以商品名Opdivo的名字于2014年6月在日本獲得批準(zhǔn)用于治療黑色素瘤，成為全球第一個(gè)被批準(zhǔn)的PD-1藥物，隨后于2014年12月在美國獲得批準(zhǔn)，2015年3月以創(chuàng)紀(jì)錄的速度在申報(bào)后四天內(nèi)得到美國FDA批準(zhǔn)，用于治療鉑化療后依然進(jìn)展的轉(zhuǎn)移性鱗狀非小細(xì)胞肺癌。

后記

從本庶佑1992年發(fā)現(xiàn)PD-1蛋白，到2014年Nivolumab上市，中間經(jīng)歷了22年，即使從2000年明確PD-1/PD-L1的功能算起也經(jīng)歷了14年，藥物研發(fā)的艱巨，可見一斑。毫無疑問，PD-1/PD-L1的發(fā)現(xiàn)要?dú)w功用于本庶佑等人，本庶佑很可能會因此獲得諾貝爾獎，但從Nivolumab的發(fā)現(xiàn)過程也可看出，作為基礎(chǔ)科學(xué)家，他們對這個(gè)藥物的開發(fā)并無太多貢獻(xiàn)。本庶佑和Freeman等人可能在之后的很多年都一直沒意識到PD-1/PD-L1對癌癥治療的作用。

另一個(gè)例子是CTLA-4蛋白，之前一直認(rèn)為，活化后的T細(xì)胞表面高表達(dá)CTLA-4蛋白，當(dāng)抗原遞呈細(xì)胞表面的B7家族蛋白（B7-1，B7-2）結(jié)合CTLA-4后，就起到抑制T細(xì)胞活化的作用。于是人們推測，CTLA-4單抗通過阻斷CTLA-4與B7家族蛋白結(jié)合而負(fù)調(diào)控對T細(xì)胞的抑制。從而發(fā)揮抗腫瘤作用。2018年5月馬里蘭大學(xué)的劉陽和鄭盼指出，這個(gè)假說可能是錯(cuò)的（21、22）。在這兩篇文章中，他們指出，CTLA-4抗體是通過清除腫瘤局部的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，而不是阻斷CTLA-4/B7信號通路來實(shí)現(xiàn)治療癌癥的療效。這并不影響CTLA-4單抗成為一個(gè)年銷售過10億美元的重磅炸彈藥物。有理由揣測，不遠(yuǎn)的將來可能會有人發(fā)現(xiàn)，PD-1抗體的抗癌療效并不完全是因?yàn)樽钄郟D-1/PD-L1通路，而是另有門徑。

中國的制藥行業(yè)正在試圖轉(zhuǎn)型進(jìn)軍創(chuàng)新藥開發(fā)，在為陳列平、王常玉等華人在腫瘤免疫領(lǐng)域做出的成功自豪的同時(shí)，這一領(lǐng)域曲折的幾十年里可能也有一些經(jīng)驗(yàn)和教訓(xùn)對中國的創(chuàng)新藥行業(yè)有用。創(chuàng)新藥離不開基礎(chǔ)科研的積累，創(chuàng)新藥的開發(fā)過程和基礎(chǔ)科研的關(guān)系更像是果樹與土地的關(guān)系。沒有深厚的基礎(chǔ)科研的積累，很難產(chǎn)生創(chuàng)新藥。美國至今仍是基礎(chǔ)科研實(shí)力最雄厚的國家，絕大多數(shù)的創(chuàng)新藥也誕生在美國，這就好像貧瘠土地上的果樹，難以長出豐碩的果實(shí)。但是沒有果樹的土地里也沒法憑空長出水果來，最多長幾顆山藥蛋。沒有本庶佑等人發(fā)現(xiàn)PD-1的功能，Opdivo的誕生無從談起。沒有Medarex團(tuán)隊(duì)獨(dú)具慧眼研發(fā)PD-1抗體用于癌癥治療，本庶佑這一成果是否會淹沒在故紙堆里我們今天已不得而知，從Organon自己的PD-1抗體項(xiàng)目來看，恐怕是兇多吉少。基礎(chǔ)科學(xué)家和新藥開發(fā)公司的定位不同，評估新藥的臨床意義和商業(yè)意義，不是基礎(chǔ)科學(xué)家的職責(zé)，也不應(yīng)該去期待基礎(chǔ)科學(xué)家能完成創(chuàng)新藥的研制和開發(fā)。Medarex團(tuán)隊(duì)篩選到抗體僅僅用了1年多，但是建立評價(jià)抗體功能的方法體系又花了2年，臨床試驗(yàn)更是花了8年。默沙東公司在臨床試驗(yàn)上的大膽設(shè)計(jì)，讓原本進(jìn)度落后4年的項(xiàng)目能和BMS最后同時(shí)沖線。一個(gè)藥物從實(shí)驗(yàn)室走向市場，后續(xù)開發(fā)的重要性不比前期篩選低。從Medarex和小野制藥的談判結(jié)果不難看出，Medarex一開始就意識到PD-1抗體的重要性，和小野制藥的合作手法多少有點(diǎn)合縱連橫的味道，而小野制藥則多少有點(diǎn)被蒙在鼓里。隨著國內(nèi)創(chuàng)新藥的發(fā)展，創(chuàng)新藥公司必然會開展一系列的外部合作，如何開展商務(wù)拓展，相信對國內(nèi)大多數(shù)創(chuàng)新藥公司都是一個(gè)挑戰(zhàn)。

參考文獻(xiàn)：

Ishida, Y., Y. Agata, K. Shibahara, and T. Honjo. Induced expression of PD-1, a novel member of the immunoglobulin gene superfamily, upon programmed cell death.EMBO J. 1992 11:3887–3895
Shinohara, T., Taniwaki, M., Ishida, Y., Kawaichi, M., &Honjo, T. (1994). Structure and Chromosomal Localization of the Human PD-1 Gene (PDCD1). Genomics, 1994 23(3), 704–706.
Nishimura H, Nose M, Hiai H, Minato N, Honjo T. Development of lupuslike autoimmune diseases by disruption of the PD-1 gene encoding anITIM motif-carrying immunoreceptor. Immunity 1999;11:141–51.
Freeman GJ, Long AJ, Iwai Y, Bourque K, Chernova T, Nishimura H,et al. Engagement of the PD-1 immunoinhibitory receptor by a novel B7family member leads to negative regulation of lymphocyte activation.J Exp Med 2000;192:1027–34.
Dong H,?Zhu G,?Tamada K,?Chen L.B7-H1, a third member of the B7 family, co-stimulates T-cell proliferation and interleukin-10 secretion.Nat Med.?1999?Dec;5(12):1365-1369.
DongH, Strome S, Salomao D, Tamura H, Hirano F, Flies D. et al. Tumor-associated B7-H1 promotes T-cell apoptosis: a potential mechanism of immune evasion. Nat Med. 2002 Jun; 8, 793–800.
Honjo,S.Shibayama, K.Takeda, M, Matsuo, T.Yoshida, M.Miyamoto, Substance Specific to Human Pd-1
Wang, K. B. Thudium, M. Han, X. T. Wang, H. Huang, D. Feingersh, C. Garcia, Y. Wu, M. Kuhne, M. Srinivasan, et al. In vitro characterization of the anti-PD-1 antibody nivolumab, BMS-936558, and in vivo toxicology in non-human primates. Cancer Immunol. Res 2014. 2: 846–856
https://www.fdanews.com/articles/72247-ono-and-medarex-enter-into-collaborative-research-agreement
https://news.bms.com/press-release/partnering-news/bristol-myers-squibb-and-ono-enter-strategic-agreement-anti-pd-1-antib
Methods for treating cancer using anti-pd-1 antibodies
Human Monoclonal Antibodies To Programmed Death 1(PD-1) And Methods For Treating Cancer Using Anti-PD-1 Antibodies Alone or in Combination with Other Immunotherapeutics
Methods for treating cancer using anti-PD-1 antibodies in combination with anti-CTLA-4 antibodies
https://news.bms.com/press-release/partnering-news/bristol-myers-squibb-and-ono-pharmaceutical-company-enter-settlement-a
https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT00441337
https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT00729664
JR, Drake. CG, Wollner. I, Powderly.JD, Picus.J, Sharfman WH, et al. Phase I Study of Single-Agent Anti–Programmed Death-1 (MDX-1106) in Refractory Solid Tumors: Safety, Clinical Activity, Pharmacodynamics, and Immunologic Correlates. J Clin Oncol.?2010 28(19) 3167-3175.
SL, Hodi.FS, Brahmer.JR, Gettinger.SN, Smith.DC, McDermott.DF, et al.Safety, activity, and immune correlates of anti-PD-1 antibody in cancer. N Engl J Med. 2012 Jun 28;366(26):2443-54.
https://www.forbes.com/sites/davidshaywitz/2017/07/26/the-startling-history-behind-mercks-new-cancer-blockbuster/#5df01e89948d
https://www.fiercepharma.com/sales-and-marketing/bms-sues-ex-account-manager-claiming-she-took-pd-1-marketing-secrets-to-merck
Du X, Tang F, Liu M, Su J, Zhang Y, Wu W et al. A reappraisal of CTLA-4 checkpoint blockade in cancer immunotherapy.Cell Res. 2018 Apr;28(4):416-432.
Du X, Liu M, Su J, Zhang P, Tang F, Ye P et al. Uncoupling therapeutic from immunotherapy-related adverse effects for safer and effective anti-CTLA-4 antibodies in CTLA4 humanized mice. Cell Res. 2018 Apr;28(4):433-447.
JR, Tykodi.SS, Chow.LQ,Hwu.WJ, Topalian.SL,Hwu.P,Drake. et al. Safety and activity of anti-PD-L1 antibody in patients with advanced cancer. N Engl J Med.?2012 Jun 28;366(26):2455-65.